RESUMO
Introducción: en la actualidad las especies del género Aeromonas han emergido como un problema de salud pública, son ellas los agentes etiológicos de las enfermedades diarreicas con el aumento de la atención médica por años. Los procedimientos convencionales para su diagnóstico son muy engorrosos, laboriosos y duraderos. Una nueva metodología que emplea medios de cultivo cromogénicos ha permitido la simplificación y aceleración de su diagnóstico, que ofrece resultados altamente específicos. Objetivo: estudiar el efecto de la combinación de diferentes agentes selectivos de los microorganismos grampositivos sobre el aumento de la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. Métodos: se estudió el efecto inhibidor de la combinación de agentes selectivos (desoxicolato de sodio (0,05-0,2 g·L-1), sales biliares (0,65 g·L-1), verde brillante (0,025-0,03 g·L-1), cristal violeta (0,001-0,01 g·L-1) y sulfito de sodio (0,8 g·L-1) sobre los microorganismos grampositivos, así como la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. Como base se utilizó la formulación de CromoCen AGN, sin el desoxicolato de sodio. Resultados: los valores de las productividades de los medios CromoCen AE y CromoCen AGN a partir del inóculo 1,5 × 102 UFC·mL-1 resultaron, para: A. hydrophila 116,8 por ciento y 23,9 por ciento, A. caviae 100,8 por ciento y 3,95 por ciento, A. bestiarium 93,6 por ciento y 28,8 por ciento, A. culicicola 85,1 por ciento y 66,12 por ciento, A. veronii 116,7 por ciento y 59,2 por ciento, A. popoffi 86,56 por ciento y 13,2 por ciento, A. trota 94,8 por ciento y 11,25 por ciento y para A. eucrinophila 103,9 por ciento y 2,80 por ciento. La nueva composición cromogénica logró la diferenciación de los microorganismos por sus características culturales: color, forma, superficie, bordes en las colonias y proteólisis del medio circundante...
Introduction: Species of the genus Aeromonas are a current public health problem, for they are the etiological agents responsible for the growing incidence of diarrheal diseases requiring medical care. Conventional procedures for their diagnosis are very complicated, laborious and time-consuming. A new methodology based on the use of chromogenic culture media allows diagnostic simplification and acceleration, yielding highly specific results. Objective: Study the effect of combining several selective agents for gram-positive microorganisms upon an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. Methods: Assessment was conducted of the inhibiting effect of combined selective agents (sodium deoxycholate (0.05-0.2 g·L-1), bile salts (0.65 g·L-1), brilliant green (0.025-0.03 g·L-1), crystal violet (0.001-0.01 g·L-1) and sodium sulfite (0.8 g·L-1)) on gram-positive microorganisms, as well as their capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. The base used was the CromoGen AGN formulation without sodium deoxycholate. Results: Productivity values for the media CromoCen AE and CromoCen AGN based on inoculation of 1.5 × 102 CFU·mL-1 were 116.8 percent and 23.9 percent for A. hydrophila, 100.8 percent and 3.95 percent for A. caviae, 93.6 percent and 28.8 percent for A. bestiarium, 85.1 percent and 66.12 percent for A. culicicola, 116.7 percent and 59.2 percent for A. veronii, 86.56 percent and 13.2 percent for A. popoffi, 94.8 percent and 11.25 percent for A. trota, and 103.9 percent and 2.8 percent for A. eucrinophila. The new chromogenic composition enabled differentiation of microorganisms based on their cultural characteristics: color, shape, surface, colony borders and environmental proteolysis...
Assuntos
Humanos , Disenteria/etiologia , Aeromonas/patogenicidade , Compostos Cromogênicos , Sulfito de Sódio/métodosRESUMO
INTRODUCCIÓN: en la actualidad las especies del género Aeromonas han emergido como un problema de salud pública, son ellas los agentes etiológicos de las enfermedades diarreicas con el aumento de la atención médica por años. Los procedimientos convencionales para su diagnóstico son muy engorrosos, laboriosos y duraderos. Una nueva metodología que emplea medios de cultivo cromogénicos ha permitido la simplificación y aceleración de su diagnóstico, que ofrece resultados altamente específicos. OBJETIVO: estudiar el efecto de la combinación de diferentes agentes selectivos de los microorganismos grampositivos sobre el aumento de la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. MÉTODOS: se estudió el efecto inhibidor de la combinación de agentes selectivos (desoxicolato de sodio (0,05-0,2 g·L-1), sales biliares (0,65 g·L-1), verde brillante (0,025-0,03 g·L-1), cristal violeta (0,001-0,01 g·L-1) y sulfito de sodio (0,8 g·L-1) sobre los microorganismos grampositivos, así como la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas. Como base se utilizó la formulación de CromoCen AGN, sin el desoxicolato de sodio. RESULTADOS: los valores de las productividades de los medios CromoCen AE y CromoCen AGN a partir del inóculo 1,5 × 102 UFC·mL-1 resultaron, para: A. hydrophila 116,8 % y 23,9 %, A. caviae 100,8 % y 3,95 %, A. bestiarium 93,6 % y 28,8 %, A. culicicola 85,1 % y 66,12 %, A. veronii 116,7 % y 59,2 %, A. popoffi 86,56 % y 13,2 %, A. trota 94,8 % y 11,25 % y para A. eucrinophila 103,9 % y 2,80 %. La nueva composición cromogénica logró la diferenciación de los microorganismos por sus características culturales: color, forma, superficie, bordes en las colonias y proteólisis del medio circundante. CONCLUSIONES: la combinación de diferentes agentes selectivos para la inhibición de los microorganismos grampositivos coadyuvo el aumento de la capacidad de recuperación, cuantificación y diferenciación de las especies de Aeromonas.
INTRODUCTION: Species of the genus Aeromonas are a current public health problem, for they are the etiological agents responsible for the growing incidence of diarrheal diseases requiring medical care. Conventional procedures for their diagnosis are very complicated, laborious and time-consuming. A new methodology based on the use of chromogenic culture media allows diagnostic simplification and acceleration, yielding highly specific results. OBJECTIVE: Study the effect of combining several selective agents for gram-positive microorganisms upon an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. METHODS: Assessment was conducted of the inhibiting effect of combined selective agents (sodium deoxycholate (0.05-0.2 g·L-1), bile salts (0.65 g·L-1), brilliant green (0.025-0.03 g·L-1), crystal violet (0.001-0.01 g·L-1) and sodium sulfite (0.8 g·L-1)) on gram-positive microorganisms, as well as their capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. The base used was the CromoGen AGN formulation without sodium deoxycholate. RESULTS: Productivity values for the media CromoCen AE and CromoCen AGN based on inoculation of 1.5 × 102 CFU·mL-1 were 116.8 % and 23.9 % for A. hydrophila, 100.8 % and 3.95 % for A. caviae, 93.6 % and 28.8 % for A. bestiarium, 85.1 % and 66.12 % for A. culicicola, 116.7 % and 59.2 % for A. veronii, 86.56 % and 13.2 % for A. popoffi, 94.8 % and 11.25 % for A. trota, and 103.9 % and 2.8 0% for A. eucrinophila. The new chromogenic composition enabled differentiation of microorganisms based on their cultural characteristics: color, shape, surface, colony borders and environmental proteolysis. CONCLUSIONS: Combination of various selective agents for the inhibition of grampositive microorganisms led to an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species.
Assuntos
Humanos , Compostos Cromogênicos , Aeromonas/patogenicidade , Disenteria/etnologia , Sulfito de Sódio/métodosRESUMO
Introducción: el medio caldo nitrato es utilizado en los laboratorios de microbiología clínica como prueba bioquímica para la identificación de enterobacterias por la capacidad que tienen para reducir los nitratos a nitrito. Objetivo: evaluar diferentes combinaciones de bases nutritivas destinadas al desarrollo del medio de cultivo. Métodos: se seleccionó como material biológico un conjunto de cepas certificadas y aisladas pertenecientes a especies representativas de varios géneros de la familia de Enterobacteriaeceae. Se diseñaron cinco variantes y se utilizó como bases nutritivas la peptona de gelatina y el extracto de carne, en diferentes combinaciones y concentraciones, para determinar el incremento de absorbancia en el tiempo como indicador de la densidad microbiana y se calculó la velocidad de crecimiento. Se evaluó la capacidad funcional del medio de cultivo por la habilidad de las especies de reducir o no el nitrato a nitrito. Resultados: la mejor combinación de bases nutritivas correspondió a la de mayor concentración de peptona de gelatina (10 g/L) y extracto de carne (3 g/L). La evaluación organoléptica y fisicoquímica del medio de cultivo mostró características satisfactorias para este tipo de producto. Se comprobó la reducción satisfactoria del nitrato a nitrito, por los microorganismos empleados como control positivo. Conclusiones: el medio de cultivo caldo nitrato desarrollado, cumple con los requisitos de calidad y su funcionalidad microbiológica y permite la caracterización de especies bacterianas que poseen la capacidad de reducir los nitratos a nitritos(AU)
Introduction: the nitrate broth culture medium is used in clinical microbiology laboratories as a biochemical test for the identification of Enterobacteriaceae by the ability of these microorganisms to reduce nitrate to nitrite. Objective: to evaluate different combinations of nutritive bases for the development of the culture medium. Methods: certificed strains were selected as biological test material. The strains belong to different generu of the Enterobactericiae family. Five variants were designed with gelatin peptone and meat extract as nutrient bases at different concentrations and combinations, the growth rate was calculated by measuring the increase in absorbance over time as an indicator of microbial density. The functionality of the culture medium was evaluated by the ability of tested bacteria or reduce nitrate to nitrite Results: the best combination of nutritive bases contained the highest concentration of gelatin peptone (10 g/L) and beef extract (3 g/L). Physicochemical and sensory evaluation of the culture medium showed results characteristic for this type of product. Reductions of nitrate to nitrite were observed for all tested microorganisms choosed as the positive control. Conclusions: the nitrate broth culture medium developed complies the quality requiment and its microbiological functionality allows the characterization of bacterial species by the ir ability to reduce nitrate to nitrite(AU)
Assuntos
Reações Bioquímicas/métodos , Meios de Cultura , Nitratos , Peptonas , Técnicas Microbiológicas/métodosRESUMO
INTRODUCCIÓN: el medio caldo Nitrato es utilizado en los laboratorios de microbiología clínica como prueba bioquímica para la identificación de enterobacterias por la capacidad que tienen estos microorganismos para reducir los nitratos a nitrito. OBJETIVO: evaluar diferentes combinaciones de bases nutritivas destinadas al desarrollo del medio de cultivo. MÉTODOS: se seleccionó como material biológico un conjunto de cepas certificadas y aisladas pertenecientes a especies representativas de varios géneros de la familia de Enterobacteriaeceae. Se diseñaron cinco variantes y se utilizó como bases nutritivas la peptona de gelatina y el extracto de carne, en diferentes combinaciones y concentraciones, para determinar el incremento de absorbancia en el tiempo como indicador de la densidad microbiana y se calculó la velocidad de crecimiento. Se evaluó la capacidad funcional del medio de cultivo por la habilidad de las especies de reducir o no el nitrato a nitrito. RESULTADOS: la mejor combinación de bases nutritivas correspondió a la de mayor concentración de peptona de gelatina (10 g/L) y extracto de carne (3 g/L). La evaluación organoléptica y fisicoquímica del medio de cultivo mostró características satisfactorias para este tipo de producto. Se comprobó la reducción satisfactoria del nitrato a nitrito, por los microorganismos empleados como control positivo. CONCLUSIONES: el medio de cultivo caldo nitrato desarrollado, cumple con los requisitos de calidad y su funcionalidad microbiológica y permite la caracterización de especies bacterianas que poseen la capacidad de reducir los nitratos a nitritos.
INTRODUCTION: the nitrate broth culture medium is used in clinical microbiology laboratories as a biochemical test for the identification of Enterobacteriaceae by the ability of these microorganisms to reduce nitrate to nitrite. OBJECTIVE: to evaluate different combinations of nutritive bases for the development of the culture medium. METHODS: certificed strains were selected as biological test material. The strains belong to different generu of the Enterobactericiae family. Five variants were designed with gelatin peptone and meat extract as nutrient bases at different concentrations and combinations, the growth rate was calculated by measuring the increase in absorbance over time as an indicator of microbial density. The functionality of the culture medium was evaluated by the ability of tested bacteria or reduce nitrate to nitrite RESULTS: the best combination of nutritive bases contained the highest concentration of gelatin peptone (10 g/L) and beef extract (3 g/L). Physicochemical and sensory evaluation of the culture medium showed results characteristic for this type of product. Reductions of nitrate to nitrite were observed for all tested microorganisms choosed as the positive control. CONCLUSIONS: the nitrate broth culture medium developed complies the quality requiment and its microbiological functionality allows the characterization of bacterial species by the ir ability to reduce nitrate to nitrite
Assuntos
Humanos , Peptonas , Técnicas Microbiológicas/métodos , Reações Bioquímicas/métodos , Meios de Cultura , NitratosRESUMO
INTRODUCCIÓN: la mayor disponibilidad de caseína seca en polvo en el mercado y la escasa oferta de caseína húmeda, ocasionaron la factibilidad de modificar el proceso tecnológico de obtención del hidrolizado ácido de caseína. OBJETIVO: caracterización del hidrolizado ácido de caseína obtenido a escala industrial por una nueva tecnología en el Centro Nacional de Biopreparados (Cuba) y su desempeño en los medios de cultivo. MÉTODOS: se evaluaron 10 lotes del producto, a los cuales se les realizó el análisis químico, así como la evaluación del desempeño mediante la determinación de la densidad microbiana en el tiempo y la realización de las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. RESULTADOS: se demostró que el hidrolizado posee valores de los principales componentes químicos característicos de los productos que se comercializan en el mercado internacional: nitrógeno amínico 6,59 ± 0,71 por ciento, nitrógeno total 8,12 ± 0,41 por ciento y composición aminoacídica. Como características distintivas el producto muestra un contenido reducido de cloruro de sodio (32,63 ± 2,46 por ciento), calcio (334 mg/L), magnesio (133 mg/L) y pérdida por desecación (3,34 ± 0,66 por ciento). La capacidad de promoción de crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 no mostraron diferencia significativa con respecto a hidrolizados proteicos de otros proveedores: Biotécnica International, Merck y Oxoid Ltd. (p< 0,05). Se alcanzó un crecimiento bacteriano en el caldo Mueller Hinton a altas diluciones (10-6). Los valores de susceptibilidad de diferentes microorganismos a los antibióticos en el medio agar Mueller Hinton concordaron en relación con los establecidos en las normas del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). CONCLUSIÓN: el producto obtenido puede ser empleado como componente de medios de cultivo con diferentes requerimientos y con adecuada estabilidad.
INTRODUCTION: the great availability of dry powdered casein in the market and low accessibility of wet casein induced the viability of modifying the technological process for obtaining casein acid hydrolysate. OBJECTIVES: to characterize the casein acid hydrolysate obtained at industrial scale by a new technology in the National Center of Biological Products of Cuba and to test its performance in culture media. METHODS: ten product batches were tested by chemical composition analysis, and their performance was evaluated through measuring the microbial density vs time and conducting susceptibility antimicrobial tests. RESULTS: it was demonstrated that the hydrolysate had values of the main chemical components inherent to the products in the international market such as amino nitrogen 6,59 ± 0,71 percent, total nitrogen 8,12 ± 0,41 percent and aminoacid composition. As distinctive characteristics, the product shows reduced contents of some components like: sodium chloride (32,63 ± 2,46 percent), calcium (334 mg/L), magnesium (133 mg/L) and loss on drying (3,34 ± 0,66 percent). The growth encouraging capacity for Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 did not show significant differences with protein hydrolysates from other commercial sources, namely Biotecnica International, Merck and Oxoid Ltd. (p<0,05). It appeared bacterial growth in Mueller Hinton´s broth at high dilutions (10-6). The antimicrobial susceptibility values in the Mueller Hinton Agar agreed with those established by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). CONCLUSIONS: the product may be used as a component of culture media with different requirements and adequate stability.
RESUMO
Se caracterizó una peptona de soya, obtenida con enzima papaína como agente hidrolizante. La evaluación físico-química de la base nutritiva obtenida a escala piloto e industrial mostró las características físico-químicas siguientes: pérdida por desecación 1,93 por ciento, nitrógeno amínico 1,71 por ciento, nitrógeno total 8,63 por ciento, cloruros (como NaCl) 5,45 por ciento y pH 6,94. Para la evaluación funcional de los lotes piloto e industriales (3 lotes), se incorporó la peptona de soya desarrollada y una tomada como referencia, procedente de la firma Biotécnica Internacional (México) a una mezcla de bases La evaluación mostró que no existieron diferencias significativas (p<0,05) en los valores de absorbancia a 640 nm obtenidos en la promoción del crecimiento entre el producto desarrollado y el de referencia para Staphylococcus aureus ATCC 25923. Para Streptococcus pyogenes ATCC 19615, se observó una ligera superioridad (diferencia significativa para p<0,05), a partir de la quinta hora de incubación a favor de los lotes industriales en comparación con la peptona de soya de referencia. Se comprobó, que la promoción del crecimiento en los medios agar y caldo triptona soya y agar extracto de malta, para los microorganismos evaluados resultó similar o superior (diferencias significativas para p<0,05) en los elaborados con la peptona de soya experimental, en comparación con los formulados con la base de referencia
A soy peptone obtained with enzyme papain as a hydrolyzing agent was characterized. The physicochemical evaluation of the nutritive base attained at pilot and industrial scale showed the following characteristics: loss due to desiccation, 1.93 %; aminic nitrogen, 1.71 %; total nitrogen, 8.63 %; chlorides (as NaCl), 5.45 %; and pH, 6.94. For the functional evaluation of the pilot and industrial batches (3), developed soy peptone and another one taken as a reference from the Biotécnica Internacional firm (México), was incorporated to a mixture of bases. There were no significant differences (p <0.05) in the absorbance values at 640 nm obtained in the promotion of the growth between the developed product and that of reference for Staphylococcus aureus ATCC 25923. For Streptococcus pyogenes ATCC 19615, it was observed a mild superiority (significant difference for p < 0.05) starting from the 5th hour of incubation in favor of the industrial batches compared with the reference soy peptone. It was proved that the promotion of the growth in the soy triptone agar and broth media and in malt extract agar for the evaluated microorganisms was similar or higher (significant differences for p < 0.05) in those prepared with the experimental soy peptone, in comparison with the formulated with the reference base
Assuntos
Meios de Cultura , PeptonasRESUMO
Se caracterizó una peptona de soya, obtenida con enzima papaína como agente hidrolizante. La evaluación físico-química de la base nutritiva obtenida a escala piloto e industrial mostró las características físico-químicas siguientes: pérdida por desecación 1,93 por ciento, nitrógeno amínico 1,71 por ciento, nitrógeno total 8,63 por ciento, cloruros (como NaCl) 5,45 por ciento y pH 6,94. Para la evaluación funcional de los lotes piloto e industriales (3 lotes), se incorporó la peptona de soya desarrollada y una tomada como referencia, procedente de la firma Biotécnica Internacional (México) a una mezcla de bases La evaluación mostró que no existieron diferencias significativas (p<0,05) en los valores de absorbancia a 640 nm obtenidos en la promoción del crecimiento entre el producto desarrollado y el de referencia para Staphylococcus aureus ATCC 25923. Para Streptococcus pyogenes ATCC 19615, se observó una ligera superioridad (diferencia significativa para p<0,05), a partir de la quinta hora de incubación a favor de los lotes industriales en comparación con la peptona de soya de referencia. Se comprobó, que la promoción del crecimiento en los medios agar y caldo triptona soya y agar extracto de malta, para los microorganismos evaluados resultó similar o superior (diferencias significativas para p<0,05) en los elaborados con la peptona de soya experimental, en comparación con los formulados con la base de referencia(AU)
Assuntos
Peptonas , Meios de CulturaRESUMO
A soy peptone obtained with enzyme papain as a hydrolyzing agent was characterized. The physicochemical evaluation of the nutritive base attained at pilot and industrial scale showed the following characteristics: loss due to desiccation, 1.93%; aminic nitrogen, 1.71%; total nitrogen, 8.63%; chlorides (as NaCl), 5.45%; and pH, 6.94. For the functional evaluation of the pilot and industrial batches (3), developed soy peptone and another one taken as a reference from the Biotécnica Internacional firm (México), was incorporated to a mixture of bases. There were no significant differences (p < 0.05) in the absorbance values at 640 nm obtained in the promotion of the growth between the developed product and that of reference for Staphylococcus aureus ATCC 25923. For Streptococcus pyogenes ATCC 19615, it was observed a mild superiority (significant difference for p < 0.05) starting from the 5th hour of incubation in favor of the industrial batches compared with the reference soy peptone. It was proved that the promotion of the growth in the soy triptone agar and broth media and in malt extract agar for the evaluated microorganisms was similar or higher (significant differences for p < 0.05) in those prepared with the experimental soy peptone, in comparison with the formulated with the reference base.
